换一批鼠伤寒沙门菌SL1344株环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统的构建及其雏鸡免疫保护试验
Construction of host-vector balanced lethal system of Salmonella typhimurium SL1344△cya mutant and immune protection test of chickling
摘要[目的]为构建鼠伤寒沙门菌环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统,并对其生物学特性进行检测.[方法]以鼠伤寒沙门菌SL1344△cya株为亲本株,利用重组自杀性质粒(pRE△asd)介导的同源重组技术,经两步法缺失并筛选asd基因缺失株(SL1344△cya △asd).将含asd基因且无抗性的pYA3493质粒电转化至缺失株SL1344△cya△asd,构建重组菌株SL1344△cya△asd(pYA3493).[结果]试验结果表明,重组菌株SL1344△cya△asd(pYA3493)生化特性和生长速度与参考株SL1344相比差异较大,与亲本株SL1344△cya基本一致,SL1344△cya△asd(pYA3493)失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力,也不能分解H2S、半乳糖和鼠李糖,但仍保留了利用葡萄糖的能力.对1日龄雏鸡攻毒试验表明,SL1344△cya△asd(pYA3493)毒力较参考株SL1344降低了约104倍.免疫保护试验显示,1日龄雏鸡免疫SL1344△cya△asd(pYA3493)后第17天,利用鼠伤寒沙门菌参考株攻毒,保护率为62.5％.[结论]鼠伤寒沙门菌SL1344株环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统构建成功,且具有较好的免疫保护性,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服疫苗奠定基础.
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关键词
鼠伤寒沙门菌缺失株asd平衡致死系统免疫保护Salmonella typhimuriummutantasd host-vector balanced lethal systemimmunoprotection
分类号
Q939.94（应用微生物学）
栏目名称
DOI
10.13343/j.cnki.wsxb.20140559
发布时间
2015-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河南科技大学博士启动基金项目（(09001580)）
河南科技大学青年科学基金项目（(2012QN009)）
河南省高等学校重点科研项目（(15A230010)）
:Supported by the Dr.Start-up Fund Projects of Henan University of Science and Technology (09001580),by the Youth science fund project of Henan university of science and technology (2012QN009) and by the Key Project of Scientific Research in Colleges and Universities of Henan Province (15A230010)
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