换一批
换一批嗜酸嗜热古菌Sulfolobus acidocaldarius编码尿嘧啶DNA糖苷酶表达,纯化与酶学特征
Cloning, expression, purification and characterization of two uracil-DNA glycosylases from Sulfolobus acidocaldarius
摘要[目的]嗜高温微生物面临dC脱氨基生成dU损伤的巨大压力,鉴定嗜酸嗜热古菌S.acidocaldarius来源的尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)切除dU损伤的酶学活性.[方法]重组表达来源于S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型UDG,经亲和纯化得到电泳纯重组蛋白.然后利用人工合成的dU (deoxyuracil)修饰寡核苷酸片段作为底物,体外鉴定两种重组UDG的酶学特性.[结果]来源于S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型重组UDG具有相似的酶学特性.Ⅳ型UDG催化效率更高,比活性是Ⅴ型重组UDG的750倍左右.作为来自嗜热微生物的蛋白,S.acidocaldarius的Ⅳ和Ⅴ型UDG的最适反应温度为65-75℃.[结论]Ⅳ型UDG比Ⅴ型UDG水解dU碱基和脱氧核糖之间糖苷键的能力更强.
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关键词
古菌嗜酸嗜热硫化叶菌dU碱基损伤DNA修复尿嘧啶DNA糖苷酶ArchaeaSulfolobus acidocaldariusdU(deoxyuracil) damageDNA repairuracil-DNA glycosylase
主题词
热温度(Hot Temperature)尿嘧啶(Uracil)糖苷水解酶类(Glycoside Hydrolases)创伤和损伤(Wounds and Injuries)蛋白(Egg White)
分类号
Q936
栏目名称
DOI
10.13343/j.cnki.wsxb.20140468
发布时间
2015-09-11
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