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苏云金芽胞杆菌转录调控因子CodY的体外靶基因的筛选

Genome-wide identification of CodY target genes in Bacillus thuringiensis by in vitro binding analysis

摘要[目的]利用Avi-tag和Pull down技术建立体外靶基因筛选的新方法,在苏云金芽胞杆菌YBT-1520基因组范围内进行体外高通量筛选转录调控因子CodY的靶基因,为深入研究CodY在苏云金芽胞杆菌中的功能及调控网络打下基础.[方法]用Avi-tag技术对CodY蛋白进行体外生物素标记,酶切苏云金芽胞杆菌YBT-1520总DNA并在两端加上便于测序的adapter序列,用链霉亲和素树脂筛选与CodY蛋白相互作用的靶基因.[结果]在苏云金芽胞杆菌中得到了46条CodY可以直接作用的靶序列,分析发现CodY在苏云金芽胞杆菌中主要调控氨基酸代谢、糖代谢、脂肪酸代谢、转运、调控、DNA修复、双组份调控等的转录.[结论]本研究采用的Avi-tag技术具有特异性强、操作简单、成本低等优势,为转录因子体外靶序列的高通量筛选提供新的方法;苏云金芽胞杆菌中CodY靶基因的筛选为其他微生物中CodY的功能研究打下基础.

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DOI 10.13343/j.cnki.wsxb.20150477
发布时间 2016-07-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金((30900016)) 湖北省自然科学基金((2014CFB931)) Supported by the National Natural Science Foundation of China ((30900016) and by the Natural Science Foundation of Hubei Province of China (2014CFB931))
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微生物学报

微生物学报

2016年56卷7期

1178-1185页

ISTICPKUCSCDCABP

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