高浓度2-KLG对氧化葡萄糖酸杆菌WSH-003中2-KLG合成途径关键基因表达的影响
Effect of high 2-KLG concentration on expression of pivotal genes involved in 2-KLG synthesis in Gluconobacter oxydans WSH-003
摘要[目的]研究高浓度的2-KLG对其生产菌株氧化葡萄糖酸杆菌生产过程中关键的脱氢酶合成基因、辅因子合成基因及其转运蛋白编码基因的影响.[方法]测定高浓度梯度2-KLG下氧化葡萄糖酸杆菌的生长情况,确定合适的添加浓度对氧化葡萄糖酸杆菌进行胁迫.使用实时定量PCR技术检测2-KLG合成中关键山梨醇脱氢酶基因sldAB、关键辅因子PQQ合成基因pqqABCDE及5个潜在转运蛋白合成基因的变化.[结果]根据氧化葡萄糖酸杆菌在2-KLG高浓度梯度下生长测定实验结果,选定40、80和120 g/L 2-KLG作为添加浓度.实时定量PCR结果显示,在高浓度的2-KLG压力下,PQQ合成基因pqqABCDE未受到显著影响,山梨醇脱氢酶基因sldAB以及部分PQQ潜在转运蛋白编码基因的表达均显著下调.[结论]高浓度2-KLG会抑制氧化葡萄糖酸杆菌中山梨醇脱氢酶基因的表达,有可能会影响辅酶PQQ的转运,但不会显著影响辅酶PQQ的合成.
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