体外法研究猪后肠道对芳香族氨基酸的发酵特性
Metabolic pattern of pig hindgut bacteria on aromatic amino acids by an in vitro fermentation method
摘要[目的]采用体外发酵技术探究芳香族氨基酸在猪后肠的发酵特性.[方法]以杜×长×大育肥猪回肠、盲肠和结肠食糜为接种物,接种于10 mmol/L单一氨基酸的培养基中,37℃培养24 h,测定4、8、12、16和24 h的产气量(GP),采集Oh和24 h样品,测定样品中的氨氮(NH3-N)和微生物蛋白(MCP)浓度,利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)和Real-time PCR定量技术分析体外培养中参与代谢特定氨基酸的细菌组成及数量.[结果]不同芳香族氨基酸的发酵液中NH3-N和MCP浓度存在极显著差异(P<0.01),肠段对GP、NH3-N和MCP影响极显著(P<0.01),且芳香族氨基酸与肠段对GP、NH3-N和MCP浓度均存在交互作用(P<0.01).定量PCR表明,芳香族氨基酸和肠段均显著影响发酵液中总菌数量(P<0.05).DGGE分析显示,同一肠段不同芳香族氨基酸组的细菌群落结构具有高度的相似性,其中回肠Phe组和Tyr组、结肠Tyr组和Trp组的相似性分别高达87.9%和80.5%,盲肠和结肠微生物香农指数变化显著(P<0.05).[结论]不同芳香族氨基酸的肠道代谢菌具有差异性,与Trp和Phe相比,Tyr的盲肠和结肠代谢菌多样性较低,与Trp和Tyr相比,Phe更多地合成菌体;特定芳香族氨基酸的不同肠道发酵去向不同,与回肠和盲肠比,结肠中芳香族氨基酸更多地合成菌体.
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