尿道致病性大肠杆菌U17株rstA缺失株降低对小鼠的致病性
Deletion of the rstA gene of uropathogenic Escherichia coli strain U17 led to attenuation of virulence in mouse
摘要[目的]探究双组份系统RstA/RstB中效应基因rstA对尿道致病性大肠杆菌毒力的影响.[方法]利用λRed重组系统构建UPEC U17 rstA缺失株U17 ⊿rstA,并构建相应的回复株,通过体内外试验评价rstA基因缺失对UPEC毒力的影响.[结果]生长曲线的测定结果显示,在LB普通培养基中,缺失株生长速度与野生株相似,但在LB贫铁培养基中,缺失株生长速度较野生株相比明显下降;体外环境应激试验结果显示,缺失株在强酸、强碱、高渗透压、尿素、氧化应激等环境压力下的生存能力与野生株相似;菌株生物被膜检测结果显示,缺失株的生物被膜形成能力与野生株相当;荧光定量PCR检测结果显示,rstA基因在贫铁环境下的表达水平较正常条件下显著上调,暗示贫铁环境可能是rstA发挥效应的刺激信号.6周龄BALB/c小鼠尿道感染试验结果显示,rstA缺失株在尿液、膀胱、肾脏中的带菌量显著低于野生株,而回复株毒力恢复至野生株水平,表明rstA缺失能显著降低UPEC U17的毒力.[结论]rstA与尿道致病性大肠杆菌的致病性相关,为潜在的毒力因子.
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