日化产品中洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Bcc)的分类和神秘伯克霍尔德氏菌的耐药性研究
Typing and identification of Burkholderia cepacia complex and drug resistance of Burkholderia aenigmatica from daily chemical products
摘要[目的]对从 2020-2022 年不同日化产品中分离的 29 株洋葱伯克霍尔德氏菌复合群(Burkholderia cepacia complex,Bcc)进行分类和分型,另将 2020 年前来源于日化产品中 6 株被鉴定为Burkholderia lata的菌株进行分类更正.探究神秘伯克霍尔德氏菌(Burkholderia aenigmatica)的耐药性.[方法]本文主要应用多位点分型研究方法(multilocus sequence typing,MLST),PCR扩增atpD、gltB、gyrB、recA、lepA、phaC和trp B 7 个管家基因片段,将测序结果与MLST数据库中的数据比对分析,获得菌株各管家基因的编号和ST型(sequence type),对本检测中心分离自日化产品的Bcc进行分型;利用多位点序列分析(multilocus sequence analysis,MLSA),结合MLST中等位基因的核苷酸序列构建进化树,从而对Bcc进行系统发育分析和鉴定.利用最小抑菌浓度法(minimum inhibitory concentration,MIC)测定Bcc对常见防腐剂(1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲、卡松、苯甲酸钠、山梨酸钾)和抗生素(头孢他啶、卡那霉素、四环素)的耐药性.[结果]本文29株Bcc菌株共有5个菌种类型(B.cenocepacia、B.contaminans、B.aenigmatica、B.vietnamiensis和B.stabilis)和 15 个不同分型,分类过程中发现了 7 个新等位基因,7 个新 ST 分型(ST2118、ST2120、ST2122、ST2127、ST2128、ST2129 和ST2130)并鉴定了其种类.另将 2020 年前来源于样品中 6 株被鉴定为 Burkholderia lata 的菌株用 MLST 法重新分类鉴定,其鉴定结果均为Burkholderia aenigmatica.11 株B.aenigmatica分离株中只有 1 株对头孢他啶耐药,其他菌均对其不耐药,分别有 9 株和 8 株B.aenigmatica对卡那霉素和四环素耐药.卡松和 1,3-二羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲(1,3-dimethylmethylol-5,5-dimethylhydantoin,DMDMH)在最大允许量范围内能有效抑制B.aenigmatica的生长,有 9 株B.aenigmatica表现出苯甲酸钠和山梨酸钾的耐药性.[结论]Bcc的分类较为复杂且存在许多未知等位基因和分型,Burkholderia aenigmatica已经成为污染日化产品的主要Bcc菌株.大部分B.aenigmatica对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有耐药性,大部分来自日化产品中的B.aenigmatica对苯甲钠和山梨酸钾均具有耐药性.
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