来源于超嗜热古菌雅氏火球菌(Pyrococcus yayanosii)CH1耐热耐压脯肽酶的酶学性质研究
Characterization of a thermostable and piezotolerant prolidase from the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus yayanosii CH1
摘要[目的]脯肽酶是一种能从二肽(Xaa-Pro)的C末端水解脯氨酸或羟脯氨酸残基的肽酶.对深海来源的雅氏火球菌(Pyrococcus yayanosii)CH1基因组中PYCH_07700基因编码的蛋白Pyprol的体外酶学性质进行研究,以期发现新型脯肽酶.[方法]在小宝岛热球菌(Thermococcus kodakarensis)TS559中异源表达Pyprol.使用二肽Met-Pro作为底物,检测重组蛋白的脯肽酶活性.[结果]Pyprol的最适温度为100 ℃,最适pH为6.0.Pyprol在与Co2+结合时活性最高,最适的金属离子浓度为1.2mmol/L.与P.furiosus来源的脯肽酶Pfprol相比,Pyprol在更宽的pH范围具有活性,并且能够耐受更高浓度的金属离子.Pyprol是耐压蛋白,最适静水压为40 MPa.与常压条件下相比,40 MPa下,Pyprol在40、70和100 ℃均有更高的活性.[结论]来源于深海热液喷口的严格嗜压的超嗜热古菌P.yayanosii CH1的新型脯肽酶Pyprol具有热稳定和耐压特性.
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