摘要[目的]利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)加工废弃物,并从发酵液中鉴定出一种新型抗菌肽(命名为BCE3),探究其对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的抑菌作用和机制.[方法]通过超高效液相色谱-质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS)对发酵液中的小分子多肽序列进行鉴定,并进一步通过生物信息学筛选潜在抗菌肽;通过微量稀释法和平板涂布法分析BCE3对蜡样芽孢杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最 低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和时间-杀伤曲线(time-kill curve);通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)泄漏、碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色分析、核酸和蛋白质泄漏实验以及流式细胞术分析BCE3对细菌细胞壁和细胞膜的影响;通过DNA凝胶阻滞实验、与EB竞争性结合的荧光光谱实验以及分子对接模拟实验探究BCE3对细菌DNA的影响;通过菌落计数法探究BCE3在米饭中的抑菌作用.[结果]利用生物信息学筛选出潜在抗菌肽BCE3,其对蜡样芽孢杆菌的MIC和MBC分别为62.5μg/mL和125.0 μg/mL,其可在3 h内使细菌数减少86.0％(62.5 μg/mL),与乳酸链球菌素(nisin)相比具有更好的杀菌效果.BCE3破坏细菌细胞壁和细胞膜,导致细胞胞内核酸和蛋白质泄漏,并与细菌DNA结合并导致细菌死亡.另外,BCE3(125.0 μg/mL)对米饭中蜡样芽孢杆菌的生长具有明显的抑制作用.[结论]BCE3能够改变蜡样芽孢杆菌细胞膜的通透性,同时与细菌的DNA结合导致细菌死亡.这些发现为BCE3应用于蜡样芽孢杆菌的防治提供了理论基础.