土壤丛枝菌根真菌准离体培养体系的建立
Establishment of an in vitro quasi-asymbiotic culture system for indigenous arbuscular mycorrhizal fungi from soil
摘要[目的]丛枝菌根(arbuscular mycorrhizal,AM)真菌是植物根围微生物群的关键组成部分,能与 72%的陆生植物形成共生体.然而,AM真菌属于植物专性共生土壤真菌,难以进行富集分离和人工纯培养.本研究旨在建立一种基于添加根系分泌物的非植物共生培养体系,以解决AM真菌难以离体培养的问题.[方法]利用"多层三明治"夹膜培养体系,对土壤AM真菌孢子进行非植物共生的准离体培养,并采用分子系统学方法对培养的AM真菌进行鉴定.[结果]利用"多层三明治"夹膜培养体系对土壤AM真菌进行非植物共生的准离体培养,发现紫云英的根系分泌物能有效促进AM真菌的菌丝生长.与培养 30 d和 45 d相比,在培养 60 d时产生大量的次生孢子,数量为(951±45)个.进一步的孢子回接试验表明,该培养产生的次生孢子能侵染紫云英幼苗根系.使用分子鉴定法鉴定出适用于"多层三明治"夹膜培养体系的 2 种AM真菌,分别为摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)和隐类球囊霉(Paraglomus occultum).使用模拟紫云英根系分泌物成分配制的营养液对AM真菌孢子进行"多层三明治"夹膜离体培养,结果表明添加根系分泌物显著促进AM真菌菌丝生长.[结论]在植物培护的"多层三明治"夹膜培养体系中,紫云英根系分泌物能持续诱导AM真菌在非共生条件下产生菌丝体和具有侵染宿主植物能力的次生孢子.本研究为进一步解决AM真菌离体培养和分离鉴定等问题提供了新方法.
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