摘要新型氮杂环卡宾银配合物(N-heterocyclic carbene silver,Ag-NHC)兼具优异的稳定性、水溶性和杀菌活性,是具有巨大应用前景的抗菌候选物.[目的]探讨合成的 1,3-二苄基Ag-NHC[1,3-dibenzyl-4,5-diphenylimidazol-2-ylidene silver(I)acetate,SBC3]对大肠杆菌的抗菌活性及作用机制.[方法]采用可见分光光度法检测SBC3 的抗菌活性;使用透射电子显微镜观察SBC3 处理后大肠杆菌 DHB4 菌株的形态学变化;通过 5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)[5,5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]实验检测SBC3 处理后DHB4 胞内硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)及硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)的活性和谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量;利用流式细胞术检测SBC3 对DHB4 胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的影响,并通过还原剂二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)进行挽救实验.通过在实验室连续传代,获得SBC3 耐受性大肠杆菌菌株SBC3-resistant strains(SRSs).其中 SRS3、SRS4 和 SRS7 菌株对 SBC3 的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)依次为 24、32 和 56 μg/mL,分别为野生菌株MIC的 3 倍、4 倍和 7 倍.将对应的菌株分别命名为SRS3、SRS4 和SRS7,并使用这 3 种菌株复测上述指标;采用Western blotting检测SBC3 对Trx1 及S-谷胱甘肽化蛋白(S-glutathionylated proteins,S-PSSG)表达量的影响.[结果]SBC3 对实验菌株的MIC为 8.0-30.0 μg/mL;SBC3 处理后的DHB4 菌株发生肿胀,并伴有内容物流出;SBC3 可显著抑制DHB4 胞内Trx和TrxR的活性,明显降低GSH的含量,同时升高ROS水平.此外,SBC3 处理后的SRS3、SRS4 和SRS7 菌株胞内Trx和TrxR的蛋白活性降低,GSH含量和S-PSSG的蛋白表达水平降低,但与DHB4 菌株相比有不同程度的升高.[结论]SBC3 通过靶向大肠杆菌的硫醇依赖的氧化还原系统(thiol-dependent redox system,TDRS)系统发挥其抗菌作用,为SBC3 作为新型抗菌剂的开发设计提供了新思路.