摘要[目的]小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)是耶尔森氏菌病(yersiniosis)的主要致病因子,是全球最重要的食源性致病菌之一.本研究的目的在于分离、鉴定其烈性噬菌体,并探讨噬菌体的应用潜力.[方法]以Yersinia enterocolitica CICC 10869 为指示宿主,采用双层琼脂平板法从浙江省宁波市北仑区路林市场下水道中分离得到一株烈性噬菌体 Yersinia phage Yen-yong1(简称Yen-yong1),对其进行形态学观察、宿主范围测定、全基因组测序、基因功能注释、系统进化地位分析、理化耐受性测定以及生物被膜去除能力测定,并检测其对生猪肉片中小肠结肠炎耶尔森氏菌的清除作用.[结果]Yen-yong1 可在 1.5 h 内使菌液裂解澄清.透射电镜下,Yen-yong1 呈长尾病毒样(Siphovirus-like),椭圆形头部长(83.32±0.15)nm、宽(59.57±2.28)nm;尾长(168.04±3.21)nm.Yen-yong1 的dsDNA基因组全长 51 321 bp,G+C含量为 47.80％,包含 93 个开放阅读框(open reading frames,ORFs),且不含影响应用的溶原、耐药或毒力因子基因.Yen-yong1 与公共数据库中的其他噬菌体基因组间的最高核苷酸序列相似度低至 20.64％,远低于属界限值(70.00％);与其他噬菌体间共享的核心基因(core gene)占比最高值仅为 20.00％,小于亚科阈值(27.00％-79.00％).Yen-yong1 在有尾纲(Caudoviricetes)中代表一个新的属和亚科.Yen-yong1 具有种特异性,仅裂解小肠结肠炎耶尔森氏菌,在 4 株供试小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株中可裂解3 株.Yen-yong1 在-80-60℃、pH 2.0-13.0、0-3％氯化钠的胁迫下均保持高水平的溶菌活性.此外,Yen-yong1 能够破坏细菌生物被膜.在 25℃下,当噬菌体与宿主的感染复数(multiplicity of infection,MOI)为 100 时,Yen-yong1 对生猪肉片中小肠结肠炎耶尔森氏菌 CICC 10869、CICC 21669 和CMCC 52202 株的清除率分别为 93.48％、52.77％和 43.24％;在 4℃下,3 株供试菌株均可增殖,而在 MOI 为 100 时,Yen-yong1 对生猪肉片中 CICC 10869、CICC 21669 和 CMCC 52202 株的清除率分别为 98.28％、78.35％和 96.33％.[结论]Yen-yong1 代表一个以往未知的进化谱系,其具有优良的生物学特性以及在常温和低温下良好的保鲜潜力.本研究拓宽了对噬菌体的认知,丰富了噬菌体库和基因库,为食源性耶尔森氏菌病的防控奠定了基础.