一种聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)水解新酶的挖掘与酶学性质分析
Discovery and characterization of a new enzyme for hydrolyzing polyethylene terephthalate(PET)
摘要[目的]聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)的生物酶法解聚是通过PET水解酶催化PET水解,得到终产物对苯二甲酸和乙二醇.通过基因挖掘获得新的PET水解酶,可为废弃PET的生物酶法解聚提供可用于分子改造的蛋白.[方法]通过基因挖掘的方法发现来源于Alkalilimnicola ehrlichii的未知功能蛋白(命名为AePETase)具有水解无定形PET膜的活性,并对AePETase进行异源表达、纯化和酶学性质研究.[结果]确定了AePETase的Tm值为(53.0±0.7)℃,最适反应温度为 45℃,最适缓冲液体系为 Na2HPO4-NaH2PO4(100 mmol/L,pH 8.0),较合适的酶浓度为 1.0 μmol/L以内.在 45℃条件下,无定形PET膜的水解产物量为已报道的IsPETase的 13.4 倍(72 h).[结论]AePETase对PET具有较好的水解活性,是一种具有较大潜力的PET水解新酶.
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