换一批猪链球菌血清4型毒力株鉴定多重PCR方法的建立
A multiplex PCR method for identification of virulent strains of Streptococcus suis serotype 4
摘要猪链球菌(Streptococcus suis)不仅是猪的重要致病菌,还是一种人兽共患病原体.该菌血清型众多,其中血清 4 型(SS4)属于可感染人类的血清型,因其潜在的高致病性,对公共卫生构成威胁.[目的]开发一种基于SS4 毒力株特有毒力相关基因的多重PCR方法,以实现SS4 毒力株的精准鉴定.[方法]基于前期研究,选择sly、igdE、tran和sao这 4 个SS4 毒力株特有的靶基因,结合SS4 血清型特异基因wzy作为内参基因,设计了一套五重PCR方法.通过优化多重PCR扩增体系,进行了特异性和敏感性试验,并应用该方法检测新分离的SS4 菌株.同时,结合斑马鱼毒力试验验证该方法的准确性.[结果]该多重PCR方法能特异性扩增靶基因,有效区分SS4 毒力株与弱毒株.其敏感性高,最低可检测到 4.1×102 CFU的菌落数或 12.5 pg的基因组DNA.特异性验证表明,该方法能准确辨识SS4 毒力株.利用该方法检测临床分离的 6 株SS4菌株:3 株菌株被鉴定为毒力株,对斑马鱼的致病性较高,死亡率为 60.00%-86.67%;3 株被鉴定为弱毒株的菌株对斑马鱼的致病性低,死亡率为 0-6.67%.[结论]本研究开发了一种基于猪链球菌毒力相关基因的多重PCR方法,能够准确、灵敏地鉴定SS4 毒力株,为猪链球菌病的早期诊断和有效防控提供了技术支撑.
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10.13343/j.cnki.wsxb.20250119
发布时间
2025-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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