换一批单链二聚体化策略增强轮状病毒△VP8*疫苗免疫原性
Single-chain dimerization enhances the immunogenicity of rotavirus △VP8* vaccine
摘要[目的]轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿急性脱水性胃肠炎的主要病原体,目前尚无特效治疗药物,预防性疫苗接种是控制感染的有效手段之一.本研究以RV受体结合域viral protein 8*(VP8*)为靶点,选取其功能区域片段△VP8*(第65-223位氨基酸),构建单链二聚体△VP8*-sc-dimer.采用pET-30a(+)载体在原核系统中表达并纯化该重组蛋白,评估其免疫原性和诱导中和抗体的能力,为开发安全有效的RV亚单位疫苗提供科学依据.[方法]通过基因合成获得△VP8*-sc-dimer序列,运用同源重组技术将其导入pET-30a(+)原核表达载体.将纯化的重组蛋白与佐剂AddaVax混合后,肌内注射 6-7 周龄BALB/c小鼠.采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中△VP8*特异性抗体滴度,通过病毒中和试验评估免疫血清的中和活性.[结果]成功表达并纯化了△VP8*-sc-dimer重组蛋白,纯度约为 90%;ELISA结果显示,△VP8*组和△VP8*-sc-dimer组接种后均诱导产生了△VP8*特异性抗体,且△VP8*-sc-dimer组抗体滴度显著高于△VP8*组.病毒中和试验表明,2 组免疫血清均可中和RV Wa株,其中△VP8*-sc-dimer组的中和抗体滴度显著更高.[结论]△VP8*-sc-dimer亚单位疫苗可有效刺激机体产生针对RV Wa株的高水平抗体,且免疫应答显著优于△VP8*.具有良好免疫原性的△VP8*单链二聚体是开发新型人类RV疫苗的重要候选抗原,具有应用前景.
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关键词
人轮状病毒亚单位疫苗重组蛋白VP8*同源二聚体免疫原性human rotavirussubunit vaccinerecombinant proteinΔVP8* homodimerimmunogenicity
栏目名称
DOI
10.13343/j.cnki.wsxb.20250133
发布时间
2025-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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