换一批
换一批SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺中抗体基因稳定性
Development of SYBR Green real time quantitative PCR in analysis of stability for recombinant antibody gene in perfusion cultured cells
摘要目的 采用SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺过程中工程细胞株抗体基因的稳定性.方法取灌注培养0、7、14、21、28、35 d的CHO细胞,用SYBR Green实时定量PCR分析其抗体基因稳定性.使用标准曲线相对定量法分析CHO细胞中β-肌动蛋白和抗体基因拷贝数,以抗体基因拷贝数与β-肌动蛋白基因拷贝数的比值表示工程细胞中抗体基因水平.结果 工程细胞株工作种子、发酵罐中不同时间点样品抗体基因拷贝数保持稳定,抗体基因拷贝数相对β-肌动蛋白基因为0.93±0.10,抗体基因相对含量与培养时间之间不相关( P = 0.938).结论抗体工程细胞株在灌注培养过程中抗体基因保持稳定.
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关键词
SYBR Green实时定量PCR灌注培养基因稳定性工程细胞株SYBR GreenReal time quantitative PCRPerfusion cell cultureGene stabilityEngineering cell
栏目名称
论著
DOI
10.13309/j.cnki.pmi.2018.01.004
发布时间
2018-08-21
基金项目
甘肃省科技重大专项
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