换一批实时逆转录PCR检测G1、G2和G4型轮状病毒方法的建立
Development of real-time RT-PCRs for quantitating rotavirus serotype G1,G2 and G4
摘要目的 建立3种用于检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因的一步法实时逆转录PCR,用于本实验室G1、G2和G4型轮状病毒的快速检测和定量、定性分析.方法 设计G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因特异性引物和探针,采用G1、G2和G4型轮状病毒特异性体外转录RNAs,建立实时逆转录PCR,特异性检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因方法.结果 3种实时逆转录PCR标准曲线R2均大于0.99,扩增效率均在90％～110％之间.不同浓度体外转录RNAs重复性检测结果CV均<5％,且可以对单拷贝RNAs样本进行检测.结论 本检测方法快速、灵敏且重复性好,可以对轮状病毒VP7基因进行特异而有效的检测,为实验室轮状病毒毒株的分型和定量检测提供了特异而有效的检测方法,也为今后多重实时逆转录PCR的建立奠定了试验基础.
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