换一批正交试验法优化b型流感嗜血杆菌多糖活化工艺
Optimization of polysaccharide activation process of Haemophilus influenzae type b by orthogonal test
摘要目的 优化b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖活化工艺,提高Hib结合疫苗的产量和质量.方法 设计三因素三水平正交试验,考察不同pH、溴化氰加量和活化时间对Hib多糖衍生物、多糖蛋白结合物的影响,依据正交试验结果确定最优的多糖活化工艺,并对该工艺进行放大和验证.结果 多糖活化时pH和活化时间对多糖衍生物衍生率及重均分子量(Mw)均影响显著(P均＜0.05),溴化氰加量对多糖衍生物衍生率影响差异有统计学意义(P＜0.05),但对衍生物Mw的影响差异无统计学意义(P＞0.05).多糖衍生物衍生率和Mw与多糖蛋白结合物的多糖回收率、多糖与蛋白比值、高分子结合物含量、KD≤0.2的多糖回收率、GMT各指标均显著相关(P均＜0.05).综合多糖蛋白结合物产量、免疫原性及稳定性.确定的最优多糖活化工艺为:在pH 10.5条件下,加入与精制多糖等重的溴化氰反应5 min.结论 经优化的多糖活化工艺可以用于Hib多糖蛋白结合物规模化的生产.
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