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首页 > 微生物学通报 > 细菌耐热植酸酶基因的克隆及表达

细菌耐热植酸酶基因的克隆及表达

Clone and Expression of Thermostable Phytase Gene in Bacteria

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摘要设计筛选培养基,从203株细菌菌株中筛选到四株可以分解植酸的菌株:SD01N,SD01X,SD01B和SD01D,设计植酸酶基因特异性引物P1和P2,分别以这四株菌的基因组DNA为模板进行扩增,其中菌株SD01N出现一条明显的扩增条带,大小约1.2kb.对PCR产物进行序列分析表明,该片段含有一个编码383个氨基酸的开放阅读框架.将该片段与载体pQE-30连接后转化大肠杆菌M15,得到重组菌株SDLiuTP01,对该菌株进行培养,经IPTG诱导基因表达,与携带空载体菌株相比较,在菌株SDLiuTP01中可检测到植酸酶活力.对重组菌株的植酸酶活力考察表明,该酶在25℃～95℃温度范围均具生物活性,最适反应温度为75℃,属于耐热性植酸酶.在各pH缓冲系统中反应结果,酶活力出现两个较高值,分别为pH4.6和pH7.5.

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作者 刘丽丽 [1] 杨文博 [2] 刘忠 [2] 学术成果认领
作者单位 天津师范大学化学与生命科学学院,天津,300071;南开大学生命科学学院,天津,300071;天津市农业生物技术研究中心,天津,300192 [1] 南开大学生命科学学院,天津,300071 [2]
关键词 耐热植酸酶克隆大肠杆菌芽孢杆菌
医学主题词 植酸(Phytic Acid)细菌(Bacteria)基因(Genes)大肠杆菌(Escherichia coli)短芽孢杆菌属(Brevibacillus)
分类号 Q93（微生物学）
栏目名称
研究报告
DOI 10.3969/j.issn.0253-2654.2004.04.014
发布时间 2004-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
天津市科技攻关计划（013609811;03129985.7）
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微生物学通报

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2004年31卷4期

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