换一批
换一批下调bla表达提高pcDNA3.1+在重组菌中的稳定性
Enhanced Stability of Plasmid pcDNA3. 1 + within Salmonella typhimurium by Downregulation of the Ampicillin Resistance Gene Expression
摘要高拷贝质粒pcDNA3.1+在鼠伤寒沙门氏菌SL7207中不稳定.通过去除pcDNA3.1+中氨苄青霉素抗性基因(bla基因)的启动子序列,仅保留其核糖体结合位点,构建了新质粒pmcDNA3.1+.SL7207(pmcDNA3.1+)在含与不含氨苄青霉素的培养基中均能稳定保留其质粒.SL7207(pmcDNA3.1+)的β-内酰胺酶活力明显低于SL7207(pcDNA3.1+),且接种SL7207(pmcDNA3.1+)的液体培养基中的氨苄青霉素不易被降解.腹腔接种小鼠7d后,脾脏中SL7207(pmcDNA3.1+)的质粒稳定性仍保持在95%以上,而SL7207(pcDNA3.1+)免疫后第3d 99%丢失质粒.所以,通过降低bla基因的表达水平,为解决高拷贝质粒在沙门氏菌中的稳定性问题提供了新方法.
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分类号
S852.65+9.5
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.0253-2654.2005.05.011
发布时间
2005-11-17
基金项目
国家自然科学基金
全国高等学校优秀博士学位论文作者专项基金
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