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首页 > 微生物学通报 > 利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗

利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗

Utilization of λ-Red Recombination System and Balanced Lethal System to Reconstruct the Plasmid with Antibiotic Resistant Gene Using in Live Vaccine

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摘要质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性.利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构建的质粒转移到缺失asd基因的大肠杆菌X6097中.但由于质粒pMM085是一个23kD的大质粒,传统的基因工程操作不易进行,利用λ-Red重组系统,将表达Red重组蛋白的质粒pKD46转化含pMM085的大肠杆菌X6097,并用两端各带有39nt cat基因同源区、含全长asd基因的PCR产物电击转化此感受态细胞,在λ-Red重组系统的帮助下,成功实现了asd基因对cat基因的置换.

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作者 袁盛凌 [1] 王芃 [1] 刘向昕 [1] 王艳春 [1] 展德文 [1] 张兆山 [1] 学术成果认领
作者单位 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 [1]
关键词 λ-Red重组系统抗药性基因平衡致死系统
医学主题词 基因(Genes)抗药性(Drug Resistance)质粒(Plasmids)工程(Engineering)疫苗(Vaccines)
分类号 Q93（微生物学）
栏目名称
研究报告
DOI 10.3969/j.issn.0253-2654.2006.02.003
发布时间 2006-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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微生物学通报

微生物学通报

2006年33卷2期

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