嗜热栖热菌α-葡萄糖苷酶基因的表达及酶学性质研究
Expression and Enzymatic Characterization of Thermus thermophilus α-glucosidase Gene
摘要用PCR方法从嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)HB27中扩增出编码α-葡萄糖苷酶基因hbg,将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a(+)上,电击转化E coli BL21(DE3),获得高效表达 hbg基因的大肠杆菌重组菌.重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约为59kD,与预期分子量相符.经镍柱和阴离子交换柱纯化的重组表达的α-葡萄糖苷酶HBG最适温度为95℃,最适pH值为5.0.
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