换一批VT2-B亚单位的重组表达及单克隆抗体的制备
Prokaryotic Expression of Vero Toxin ⅡB Subunit from Escherichia coli O157 and Preparation of Monoclonal Antibodies
摘要以大肠杆菌O157 DNA为模板扩增VT2-B亚单位,纯化后经EcoRⅠ和Xho Ⅰ酶切,连入表达载体pGEX4T-2,构建重组表达质粒pGEX4T-2-VT2-B.转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,实现了VT2-B-GST融合蛋白的可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的35%.重组蛋白纯化后,免疫BALB/C小鼠制备单克隆抗体,得到2株融合细胞,制备了腹水单抗,测得单抗的ELISA效价为104.Western blot表明,该单抗能与重组蛋白特异性的结合.特异性单抗的获得为VT2毒素检测方法的建立奠定了基础.
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医学主题词
抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)大肠杆菌(Escherichia coli)质粒(Plasmids)蛋白(Egg White)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0253-2654.2007.03.019
发布时间
2007-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
上海市科技兴农项目（2004）
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