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副溶血弧菌EMA-PCR检测技术的建立

Establishment of EMA-PCR detection method of Vibrioparahaemolytic us

摘要PCR技术被广泛应用于副溶血弧菌的检测中,但传统的PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,往往使检测结果出现较高的假阳性。因此,将叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,建立一种快速、准确的副溶血弧菌检测方法。以dnaJ基因为检测副溶血弧菌的靶基因,分别用副溶血弧菌的纯培养细胞及其基因组DNA作模板进行PCR检测,灵敏度分别为2.5×104 CFU/mL和6×102fg/μL。在检测样品前处理过程中加入EMA,当EMA的浓度小于5 mg/L时,EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制;而终浓度为2 mg/L的EMA,能有效抑制1×108 CFU/mL副溶血弧菌死菌的扩增。活菌和死菌混合体系的PCR结果表明,EMA-PCR能有效降低副溶血弧菌检测过程中的假阳性。

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分类号 Q781
栏目名称
发布时间 2011-11-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
广东省科技计划项目(2006B20501008;2009B020309007); 广东省海洋渔业科技推广项目(A200901H06)
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微生物学通报

微生物学通报

2011年38卷6期

952-956页

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