喜树种子内生放线菌的分离鉴定及抗菌活性物质初分离

Isolation and identification of endophytic actinomycetes from the seeds of Camptotheca acuminata Decne.and isolation of antimicrobial substances from those endophytic actinomycetes

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摘要[目的]探究含有抗肿瘤活性喜树碱的喜树(Camptotheca acuminata Decne.)种子中内生放线菌的多样性,以及从内生放线菌中寻找新型活性化合物产生菌.[方法]利用放线菌富集培养基分离喜树种子内生放线菌,并根据菌落形态及16S rRNA基因序列同源性分析进行菌种鉴定;以及利用与病原微生物共培养方法检测分离菌株的抗菌活性.[结果]从上海交通大学校园的喜树种子中共分离到33株内生疑似放线菌,经基于16S rRNA基因序列分析的分子鉴定,确定其中21株属于链霉菌,l株属于拟诺卡氏菌,另有3株由于序列相似性低于95％而无法分类;8株因未能克隆16S rRNA基因序列而未确定分类.这11株疑似内生放线菌是否是新放线菌(种)类群,有待后续深入研究.初步的抗细菌、真菌活性检测发现,分离到的内生放线菌中42.42％以上对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Küühn)有很强的抑制菌核形成的作用,54.54％内生菌有较强抑制芽孢杆菌生长的作用.并且挑选其中具有代表性的菌株Streptomyces sp.CXSZ1进行代谢产物的分析,初步发现其代谢产物中含有抗细菌活性成分.[结论]喜树种子内生放线菌的分离、鉴定及生物活性物质分离鉴定的研究工作,一方面可以为揭示喜树等高等植物种子内生菌的起源、演化等提供有价值的信息,同时也为新结构、新活性化合物发掘提供实验材料.