换一批地衣芽胞杆菌来源角蛋白酶N端对活力及其热稳定性的影响
Effects of the N-terminus of keratinase from Bacillus licheniformis on activity and thermostability
摘要[目的]通过对一株地衣芽孢杆菌来源的角蛋白酶N端进行分子改造,研究其对角蛋白酶活力和热稳定性的影响,进而提高角蛋白酶的热稳定性.[方法]将角蛋白酶N端前5个氨基酸进行分段缺失,并通过序列比对将N端的前5个氨基酸替换为来源于Thermoactinomyce vulgaris的嗜热蛋白酶的N端,将野生型和突变体角蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌WB600中进行表达,并对重组酶进行纯化与酶学性质研究.[结果]角蛋白酶N端不同长度的缺失大幅度地降低了角蛋白酶的活力,其中缺失前5个氨基酸完全丧失了酶活力.将角蛋白酶N端前5个氨基酸替换为嗜热蛋白酶N端前12个氨基酸,虽然降低了近70％的活力,但是却增加了角蛋白酶的热稳定性,60℃条件下的半衰期t1/2由原来的9 min提高到20 min.[结论]角蛋白酶的N端对其酶活力具有较大的影响,与嗜热蛋白酶来源的N端进行替换可以有效提高角蛋白酶的热稳定性.
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栏目名称
DOI
10.13344/j.microbiol.china.130600
发布时间
2014-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（No.2011AA100905）
国家关键技术研究发展计划(十二五)（No.2011BAK10B03）
长江学者和创新团队发展计划（No.IRT1135）
江苏省自然科学基金（No.BK2012553）
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