猪源大肠杆菌Nissle1917菌株的分离鉴定

Isolation and identification of porcine-originated Escherichia coli Nissle 1917

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摘要[目的]证实大肠杆菌Nissle 1917作为自然菌株存在于动物猪体内,并能从猪粪便中分离.建立大肠杆菌Nissle 1917的原位杂交鉴定方法.[方法]采集135份健康断奶仔猪的新鲜粪便制备DNA模板,以人源大肠杆菌Nissle 1917为阳性对照菌株,分别针对Nissle 1917的Ⅰ型菌毛亚单位FimA、F1C菌毛亚单位FocA及两个质粒pMUT1和pMUT2的相关基因序列设计5对特异性引物进行PCR扩增;并将其中427 bp大小的质粒片段pMUT2(a)作为目的片段回收纯化,用地高辛随机引物标记法制成DNA探针.[结果]从其中的2份DNA模板中扩增出上述5对特异性引物PCR预期大小相符的片段,初步认为大肠杆菌Nissle 1917可能存在于猪体内.应用制备的探针通过菌落原位杂交的方法从2份阳性粪便样品中筛选出2株阳性菌落,通过血清学检验、PCR扩增和测序进一步鉴定为阳性Nissle 1917菌株.[结论]动物源益生菌Nissle 1917的分离鉴定,为优良动物源益生菌研究和应用奠定了基础.

作者杨颖 ^[1] 张伟 ^[2] 区炳明 ^[1] 夏芃芃 ^[1] 石宝兰 ^[2] 张建军 ^[2] 朱国强 ^[1] 学术成果认领

作者单位扬州大学兽医学院江苏扬州225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 ^[1] 扬州大学兽医学院江苏扬州225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009;国药集团扬州威克生物工程有限公司江苏扬州225009 ^[2]

关键词大肠杆菌Nissle 1917 分离鉴定地高辛标记探针菌落原位杂交 Escherichia coli Nissle 1917 Isolation and identification Digoxigenin-labeled nucleic acid probe Colony in situ hybridization

主题词大肠杆菌(Escherichia coli)猪(Swine)原位杂交(In Situ Hybridization)地高辛(Digoxin)动物(Animals)

栏目名称 兽医微生物

DOI 10.13344/j.microbiol.china.160296

发布时间 2017-05-23

基金项目

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