尼罗红荧光优化法快速检测微拟球藻细胞内油脂含量

Modified rapid determination of lipid content in Nannochloropsis by Nile Red fluorescence staining

摘要[目的]利用尼罗红荧光染色法快速检测微拟球藻细胞内的油脂含量.[方法]系统性地调整激发波长与发射波长,确定最佳二甲基亚砜(DMSO)浓度、尼罗红终浓度、染色时间和细胞密度的范围,比较重量法和Triolein标准品的油脂含量分别与荧光强度之间的关系.[结果]分析得出了尼罗红荧光强度与微拟球藻细胞油脂含量的关系,确定优化后染色条件为:二甲基亚砜浓度为5％,尼罗红终浓度为1 mg/L,染色时间为6min,且细胞密度为(0.5-3.0)×106 cells/mL的范围内,激发波长和发射波长分别为515nm和570 nm.重量法和Triolein标准品的油脂含量分别与尼罗红染色荧光强度之间的关联性,表明尼罗红荧光染色方法可以用来快速准确地检测细胞内的油脂含量,且油脂含量与荧光强度之间正相关,相关系数R2为0.997 3.尼罗红染色优化后油脂的检测下限达到2μg,大大减少了测定油脂含量所需细胞量.[结论]针对不同种属系统性地确认了荧光激发波长和发射波长,并优化验证得到了最佳尼罗红荧光染色条件,可以快速准确地检测微量微拟球藻细胞内的油脂含量,便于大规模筛选高产油突变藻株.

作者刘林聪 ^[1] 杨菊平 ^[2] 周健 ^[2] 朱文杰 ^[2] 罗锋 ^[1] 张晓辉 ^[1] 学术成果认领

作者单位西南大学资源环境学院生物能源与环境修复研究中心重庆400715;西南大学资源环境学院重庆400715 ^[1] 西南大学资源环境学院重庆400715 ^[2]

关键词尼罗红荧光强度油脂含量微拟球藻 Nile Red Fluorescence intensity Lipid content Nannochloropsis

主题词荧光(Fluorescence)细胞(Cells)性(Sex)方法(Methods)时间(Time)

栏目名称 环境微生物

DOI 10.13344/j.microbiol.china.170031

发布时间 2017-12-25

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