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一株凝结芽孢杆菌的分离筛选及产孢条件优化

Isolation and optimization on spore-forming conditions of Bacillus coagulans

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摘要[背景]凝结芽孢杆菌除了具有一般乳酸菌的益生功能外,还具较强的耐酸、耐胆盐、耐高温、易贮存等生物特性.[目的]从泡菜中筛选一株性能优良的凝结芽孢杆菌用于微生态制剂的制备,并对其产孢率进行优化,为该菌株的进一步工业化生产提供参考依据.[方法]采用选择性培养基通过特定的培养条件,筛选到一株抑菌效果良好的产酸芽孢杆菌,并对其进行特异性引物的鉴定、16S rRNA基因序列分析及生理生化实验.通过单因素及正交试验对菌株的产芽孢条件进行优化.[结果]筛选得到一株凝结芽孢杆菌BC01,该菌株对大肠杆菌(Escherichia coli CVCC 1527)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium CVCC 2228)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens CVCC 46)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis CVCC 503)等均有较强的抑制作用;模拟胃液处理120 min存活率达到94％;0.3％的胆盐存活率达到84.3％.单因素及正交试验优化后的最适培养基配方:糖蜜10.0 g/L,酵母浸出粉20.0 g/L,NaC1 5.0 g/L,K2HPO4 5.0 g/L,MnSO4 10.0 mg/L;最适培养条件:接种量4％,温度45℃,初始pH 7.0,转速200 r/min,培养时间36 h.在该优化条件下,其活菌数最高达到6.7×109 CFU/mL,产孢率达到89.2％.[结论]筛选得到一株可用于微生态制剂的菌株——凝结芽孢杆菌BC01,对其产孢率进行了优化,为工业化生产奠定了基础.