换一批
换一批摘要[背景]铜绿假单胞菌是一种重要的水源和食源性致病菌,可引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病.加强铜绿假单胞菌的快速检测,对保障食品安全具有重要的意义.[目的]建立聚合酶螺旋反应(Polymerase spiral reaction,PSR)方法快速检测铜绿假单胞菌.[方法]针对铜绿假单胞菌外毒素A调控基因——ETA基因(toxA)设计引物,通过引入加速引物、优化反应条件和筛选颜色指示剂,建立快速检测铜绿假单胞菌的PSR方法,并研究方法的特异性、敏感性和可靠性.[结果]建立的方法在等温65℃条件下,40 min内可完成PSR反应,且可通过钙黄绿素和羟基萘酚蓝直接判读结果.方法 特异性强、灵敏度高,最低检出限分别为20 CFU/mL细菌和1.011 5 pg/μL基因组DNA.可视化PSR方法检测包装饮用水来源的分离菌株与传统生化方法检测结果一致.[结论]研究建立的可视化PSR方法为铜绿假单胞菌DNA快速检测提供了一种可行的有效手段.
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栏目名称
生物实验室
DOI
10.13344/j.microbiol.china.180775
发布时间
2019-06-18
基金项目
江苏省食品药品监督管理局科研项目(技术类)
泰州市科技支撑计划(社会发展)
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