阻断消耗途径提高毕赤酵母工程菌S-腺苷甲硫氨酸产量
Blocking consumption pathway increases production of S-adenosyl-L-methionine by Pichia pastoris
摘要[背景]S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)作为所有生物体内的重要中间代谢物,不仅可作为膳食补充剂,还具有良好的临床应用价值.[目的]将毕赤酵母重组菌GS115/DS16的SAM消耗途径阻断,进一步提高SAM的产量.[方法]分别敲除毕赤酵母重组菌GS115/DS16的S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因sah1、S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因spe2 和 L-甲硫氨酰tRNA合酶基因msm1,构建工程菌G/Dsah、G/Dspe和G/Dmsm.检测 3 个工程菌的生长和SAM产量,以及 L-Met添加量对SAM积累的影响.[结果]与出发菌GS115/DS16 相比,工程菌G/Dsah、G/Dspe和G/Dmsm的单位菌体SAM产量分别提高了 29.3%、55.6%和 24.8%,其生长无显著差异.L-Met添加量优化后(0.06%),G/Dsah 和 G/Dmsm 单位菌体的 SAM 产量分别提高了 26.4%和 28.9%.[结论]构建的毕赤酵母工程菌可用于SAM的工业化生产,该代谢工程策略可用于改进其他化学品的生产.
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