换一批摘要[背景]牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是牛常见的易感病原体,给畜牧业带来了重大经济损失,亟须建立一种快速检测IBRV的方法.[目的]建立一种重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和微流控芯片技术相结合的IBRV可视化快速检测方法.[方法]实验选择IBRV的ul52 基因作为分子检测的目标片段.选择伪狂犬病毒、火鸡疱疹病毒、鸭瘟疱疹病毒作为对照组.通过不同稀释倍数IBRV的DNA提取液确定灵敏度.通过对 34 份疑似感染IBRV急性期病牛的血清和鼻拭子样本病原分离株的检测来分析本方法的适用性.[结果]ul52 基因扩增子大小为 403 bp,扩增子测序结果显示,得到的目标片段核酸序列与IBRV的ul52基因(NC_063268.1)相似性达100%,对照组未见扩增子,检测限为6.9×103 copies/μL.对 34 份疑似感染IBRV急性期病牛血清和鼻拭子样本病原分离株的检测结果分析发现,编号分别为SD0213、SD0518 和SD0701 的牛感染了IBRV,血清和鼻拭子样本病原分离株检测结果一致.另外,从样本DNA提取到获得检测结果的全流程时长为 110 min.[结论]本研究将RPA、磁性探针捕获和微流控技术相结合,建立了一种 IBRV 病毒的快速可视化分子检测方法,该方法具有良好的特异性和灵敏度.
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关键词
传染性牛鼻气管炎病毒重组酶聚合酶扩增磁捕获微流控芯片技术infectious bovine rhinotracheitis virusrecombinase polymerase amplificationmagnetic capturemicrofluidic chip
栏目名称
DOI
10.13344/j.microbiol.china.240286
发布时间
2024-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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