牛分枝杆菌分子标识物的筛选及在豚鼠体内的评价
Screening of molecular markers of Mycobacterium bovis and preliminary evaluation in guinea pigs
摘要[背景]牛结核病(bovine tuberculosis,BTB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)复合体中的牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起的慢性传染性疾病,对牛群健康、畜牧业经济和公共卫生构成了重大威胁.[目的]筛选牛分枝杆菌新型诊断分子标识物,以期建立牛结核病新型诊断方法.[方法]利用同位素标记的相对与绝对定量技术并结合文献报道筛选出Mpb70、GroEL2、HspX、DnaK、Mpb83、EsxW、BfrB、Hrp1、EsxL、AtpD 和 EsxN 这 11 种蛋白质进行制备,并通过豚鼠模型评价其致敏效果.[结果]当重组蛋白量为100 μg时,Mpb70、HspX、Mpb83和EsxN可引起明显的迟发型过敏反应,并且出现破溃.当使用量为50 μg时,Mpb70、HspX、Mpb83、EsxW、EsxL和EsxN可引起明显的迟发型过敏反应.当使用量低至12.5 μg时,则无法引起豚鼠的迟发型过敏反应.对不同蛋白进行组合使用,EsxW/EsxL/EsxN组合的活性最好,可刺激豚鼠产生明显的迟发型过敏反应;EsxW/EsxL、EsxW/EsxN、EsxL/EsxN组合也可引起迟发型过敏反应,但其反应程度不如EsxW/EsxL/EsxN组合.[结论]重组蛋白Mpb70、HspX、Mpb83、EsxW、EsxL和EsxN可引起较好的迟发型过敏反应,具有可替代结核菌素的应用前景.
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