高效利用纤维素原料产聚羟基脂肪酸酯菌种的选育及其发酵特性
Selection and fermentation characterization of strains for efficient utilization of cellulose-based feedstocks to produce polyhydroxyalkanoates(PHA)
摘要[背景]直接利用纤维素原料作微生物碳源来合成聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalknoates,PHA),能有效降低其生产成本,但目前仍缺乏合适的微生物菌种.[目的]获得能够直接利用纤维素原料作碳源且高效合成PHA的微生物菌种,对分离菌种进行鉴定并对其发酵特性进行研究.[方法]利用羧甲基纤维素(sodium carboxymethyl cellulose,CMC)-Na为唯一碳源,结合苏丹黑B染色和尼罗红染色法从自然环境中筛选目的菌株,研究分离菌株的滤纸崩解及纤维素酶活情况,通过形态学观察、生理生化反应及 16S rRNA基因序列同源性比较对菌株进行分类鉴定,对菌株利用纤维素发酵产PHA的相关发酵条件如氮源种类、温度、pH、接种量等进行优化,最后分别利用傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)和核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance hydrogen spectroscopy,1H-NMR)对发酵产物进行分析.[结果]筛选到 1 株高效利用纤维素产PHA的菌株FX-9,该菌能够让纤维素滤纸在短时间内崩解明显,并表现出较高的纤维素酶活性.经鉴定,该菌株为产碱杆菌属(Cupriavidus).优化结果表明,当氮源为酵母粉,温度为30℃,pH 7.0,接种量为 10%时,该分离菌株经 84 h发酵后PHA浓度达到最大值为 0.49 g/L,此时细胞内PHA含量为 42.44%.经FT-IR、1H-NMR鉴定该菌株利用纤维素原料发酵所提取的产物为聚羟基丁酸酯(polyhydroxybutyrate,PHB).[结论]分离菌株Cupriavidus sp.FX-9 能直接利用纤维素原料作为碳源且高效合成PHA,这将为实现直接利用木质纤维素原料发酵生产PHA提供菌种资源及经验借鉴.
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