HBV YIDD变异株真核表达载体的构建及鉴定
Construction and Identification of the Eukaryotic Expression Vector Containing Entire Genomic DNA of HBV Genotype C Variant YIDD
摘要构建HBV C基因型YIDD拉米夫定耐药株的全基因真核表达载体,为进一步深入探讨乙型肝炎病毒拉米夫定耐药的分子机制,寻求耐药后的有效治疗奠定基础.以重组质粒PMD18T-HBV-C为模板,采用PCR扩增HBV C基因型YIDD变异株的全基因组DNA,并将其定向克隆于真核表达载体PcDNA3.1(+)中.获得的真核表达重组质粒PcDNA3.1(+)-HBV-C(YIDD)通过酶切后电泳及测序进行鉴定.琼脂糖电泳结果证实PCR产物大小约为 3.2 kb,与预期相同.酶切及测序结果证实,HBV C基因型YIDD拉米夫定耐药株全基因真核表达载体PcDNA3.1(+)-HBV-C(YIDD)构建成功.
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