反向PCR克隆黑根霉R306Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因
Cloning of Δ6-Fatty Acid Desaturase Gene from Rhizopus nigricans R306 with Reverse PCR
摘要利用简并引物扩增出Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因的核心序列,设计与核心序列互补的反向引物,以5′端带磷酸基团的引物进行反转录cDNA,然后在 12 ℃下环化cDNA,并以此作为模板进行反向PCR,引物的延伸方向自核心区向环化分子的未知序列进行,扩增出核心区的上下游序列.应用该方法扩增并测定了黑根霉R306的Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因全序列.并对酶的低温适应机制在氨基酸序列上进行了分析.
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分类号
Q949.323.3
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-7021.2008.01.005
发布时间
2008-05-22
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)(2003AA207150)
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