换一批家蚕核型多角体病毒囊膜蛋白GP64的原核表达
Prokaryotic Expression of Silk Worm (Bombyx mor) Nucleopolyhedrovirus GP64 Gene
摘要通过Primer Premier 5.0设计1对特异性引物,用于扩增家蚕核型多角体病毒囊膜蛋白GP64的部分DNA片段,对PCR扩增得到的DNA片段进行纯化,并对纯化后的双酶切DNA片段与经同样双酶切后的原核表达载体pET28a进行连接；对捕获有重组质粒pET28 a-GP64的大肠埃希菌BL21( DE3)细胞进行IPTG诱导,通过SDS-PAGE对导产物进行电泳分析,结果表明扩增的目的片段获得了表达；通过His单抗对诱导产物进行Western Blot印迹分析,其结果表明导蛋白带为融合有组氨酸的目的蛋白.对原核表达的GP64截短蛋白和免疫佐剂进行克分研磨,将充分研磨后的匀浆液时昆明小鼠进行皮下多点注射,以制备的GP64多抗对家蛋核型多角体病毒粒子感染的BmN细胞总蛋白进行Western Blot印迹分析,结果 在杂交膜上出现一条特异杂交带、其分子量大小约为64 ku,表明制备的GP64多抗可用于其动能的进一步研究.
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DOI
10.3969/j.issn.1005-7021.2011.04.017
发布时间
2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
高级人才启动基金（(09JDG057)）
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