对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP110 N端结构特征、原核表达及检测

N-Terminal Structure Characteristic,Prokaryotic Expression & Determination of Envelope Protein VP110 of Prawn’s White Spot Syndrome Virus

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摘要VP110为对虾白斑综合征病毒（ White Spot Syndrome Virus，WSSV）的囊膜蛋白。相似性分析发现， VP110与昆虫DNA病毒经口感染关键因子PIF2具同源性，且同源区主要位于N端150~600aa。同时两者均在N端前端含一个跨膜区。为了研究VP110 N端保守区的功能，将vp110 N端基因（ Svp110，450~1830 bp）克隆至pET-16b及pGEX-4T1原核表达载体中，同时分别在大肠埃希菌BL21（DE3）、Rosetta 2菌株中优化表达条件，诱导VP110 N端蛋白（ sVP110）表达。实验结果表明，重组质粒pET-16b-Svp110在37℃1 mmol/L IPTG条件下可得到表达，但16℃下表达量很低。而重组质粒pGEX-4T1-Svp110则在16℃下得到较高表达。同时， Rosetta 2菌株的表达量高于BL21（DE3）。该研究表明Rosetta 2菌株更适合作为WSSV结构蛋白的表达，同时VP110在不同载体中的表达受温度的影响。VP110 N端蛋白的表达为VP110的功能研究打下了基础。