来源于土壤农杆菌PJD-1-1的碱性β-葡萄糖苷酶的生产、纯化及酶学性质研究

Production, Purification and Characterization of Alkaline β-Glucosidase Isolated from Agrobacterium sp.PJD-1-1

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摘要为从环境中筛选新的β-葡萄糖苷酶生产菌株,利用筛选平板涂布法从腐败的甘蔗叶中筛选目的菌株,从中筛选到1株能产p-葡糖糖苷酶的菌株PJD-1-1,16S rDNA鉴定该菌株为新型的土壤农杆菌.该菌株在20 ℃,初始pH 7.0,以乳糖为碳源,NaNO3为氮源的条件下,其酶活性最高为3.92 U/mg.经硫酸铵沉淀、葡聚糖凝胶过滤层析和离子交换层析纯化后(纯化倍数4.85,得率8.0％),SDA-PAGE分析表明得到一条分子量大小为40 kDa条带;该酶的最适反应温度和pH分别为50℃和8.0;在低于50℃条件下保有较好的稳定性;Hg2和Ag+对酶活性有明显的抑制作用,表明该酶的催化活性中心可能含有硫醇基,Ba2+、Ca2+、Pb2+、Co2+、Zn2+、Mn2+、Na++、K+、EDTA和尿素对酶活性没有明显的影响.该酶的温度稳定性、碱性特征以及对金属离子的耐受性等使其在食品及其他领域具有广泛的应用潜力.

作者姚健 ^[1] 陈庆隆 ^[1] 钟国祥 ^[1] 桂伦 ^[1] 毕文慧 ^[2] 学术成果认领

作者单位江西省农业科学院农业应用微生物研究所,江西南昌,330200 ^[1] 山东农业工程学院食品科学与工程学院,山东济南,250100 ^[2]

关键词碱性 β-葡萄糖苷酶离子交换层析金属离子土壤农杆菌PJD-1-1 alkalinity β-glucosidase ion-exchange chromatography metal ions Agrobacterium sp.PJD-1-1

主题词土壤(Soil)葡萄糖(Glucose)离子交换(Ion Exchange)金属(Metals)离子(Ions)

分类号 Q939.9

栏目名称 研究报告

DOI 10.3969/j.issn.1005-7021.2017.05.006

发布时间 2018-05-15

基金项目

Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest Natural Science Foundation of Jiangxi Province Research and Development Projects of Jiangxi Province (20161BBF60138)公益性行业(农业)科研专项 江西省青年科学基金资助项目 江西省重点研发计划项目