烟草未知叶斑病叶际真菌分离鉴定及其叶际真菌碳代谢特征
Isolation and Identification of Phyllosphere Fungi from Tobacco Leaves with an Unknown Spot Disease and Their Carbon Metabolism Characterization
摘要为诊断贵州省遵义市道真县烟田的一未知病害,了解其叶际微生态特征,采用组织分离法对其叶际真菌进行分离纯化及分子生物学鉴定,依据柯赫氏法则验证致病菌,采用扩增子测序技术对其叶际微生物群落组成与多样性进行分析,采用Biolog ECO微平板法研究其叶际微生物的代谢活性.结果表明,使用组织分离法从感病烟叶组织上共分离到10个菌属的24株真菌,致病力验证结果表明间座壳属(Diaporthe)真菌具有致病性,基于ITS、HIS和TEF1-α基因序列构建联合系统发育树并结合形态学鉴定结果,揭示引起该烟草叶斑病的病原为榆树间座壳菌(Diaporthe eres).扩增子测序结果显示,健康和感病烟叶叶际优势真菌属均为布勒酵母属(Bullera)(相对丰度分别为22.89%、10.33%)和纖柔菌属(Abrothallus)(44.01%、41.21%).感病烟叶与健康烟叶真菌群落的多样性指数无显著差异,感病烟叶的丰富度指数低于健康烟叶.功能预测结果表明,感病烟叶组织中的植物病原菌类群相对丰度高于健康组织.碳源代谢发现,健康烟叶叶际微生物碳源代谢能力强于感病烟叶,健康烟叶叶际微生物对28种碳源具有较强的代谢能力;感病烟叶叶际微生物对12种碳源有较高的代谢能力.该烟草未知叶斑病由榆树间座壳菌引起,叶际微生物还包含链格孢属、织球壳属、短梗霉属、棒孢属等致病菌,结果揭示了该未知烟草叶斑病的叶际真菌微生态特征.
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