换一批
换一批中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶
Purification of Kluyveromyces fragilis β-Galactosidase by Medium-Pressure Liquid Chromotography
摘要应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis )β-D-半乳糖苷酶.K. fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K. fragilis β-D-半乳糖苷酶.粗酶经过AKTA explorer 100 中压液相色谱的HiprepR 16/10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26/60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化,酶的回收率为27%,纯化倍数为42.纯化的K.fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上,呈现一条染色谱带,表明纯化的酶具有较高的纯度.K. fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60 000.
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