摘要异淀粉酶可水解支链淀粉的α-1,6糖苷键,为淀粉彻底水解所必须.使用仪器分析方法推断此类酶作用机制的研究国内未见报道.Thermobifida fusca异淀粉酶经镍离子亲和色谱纯化,以玉米支链淀粉(maize amylopeetin,AP)为底物,结合体积排阻色谱、高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器及氢谱核磁共振等仪器分析方法研究其作用机制.结果表明:AP分子的相对分子质量为2 812 000,水解反应2h后生成两类葡聚糖组分,相对分子质量分别为760 000和7.2 000,比例为1∶4.4;IAM随机水解支链淀粉分子的α-1,6糖苷键,并可切断带有2-3个葡萄糖残基的侧链分支点生成麦芽糖和麦芽三糖,而对α-1,4糖苷键无作用.完全水解支链淀粉生成具有α或β型还原末端的直链淀粉链或麦芽寡糖,产物聚合度(degree of polymerization,DP)主要在15~35之间.IAM作用机理的研究可为其工业化应用奠定基础.
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