换一批氨肽酶YwaD的异源表达及其在玉米肽脱苦中的应用
Heterologous Expression of Aminopeptidase YwaD and Its Application in Debittering Zein Peptides
摘要[目的]制备一种性能优良的新型氨肽酶,并初步评价其对玉米肽的脱苦能力.[方法]选取地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis,B.licheniformis)SQ1 来源的氨肽酶YwaD在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.subtilis)WB600中进行表达,纯化后探究其酶学性质及其对玉米肽的脱苦效果.[结果]氨肽酶YwaD均在B.subtilis WB600中分泌表达,其相对分子质量约为49 000.氨肽酶YwaD最适反应温度为80℃,半衰期为24 h,且在 4.0 mol/L的NaCl条件下相对酶活力高于 90%,表明该酶具有较强的耐热和耐盐性能;氨肽酶YwaD具有底物特异性,以Leu-p NA为底物时,Km为0.093 mol/L,Vmax为18.975 μg/(L·min).与碱性蛋白酶单酶酶解法制备的玉米肽(ZA)相比,氨肽酶YwaD联合碱性蛋白酶分步双酶酶解法制备的玉米肽(ZAAP)的水解度增加了12.14%;苦味氨基酸质量浓度提高了4.85倍,鲜味氨基酸质量浓度提高了4.74倍;相对分子质量小于 500的肽段占比增加了 21.14%;DPPH自由基清除率增加了 34.53%,羟基自由基清除率增加了16.59%;苦味值降低了约80%,鲜味值提高了约27%.[结论]氨肽酶YwaD可将苦味肽N端疏水性氨基酸(多为苦味氨基酸)释放出来,显著去除玉米肽的苦味并增强其抗氧化性,该酶在功能性植物肽制备中有良好的应用前景.
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关键词
氨肽酶耐高温耐高盐蛋白质水解脱苦抗氧化活性aminopeptidasehigh temperature tolerancehigh salt toleranceprotein hydrolysisdebitteringantioxidant activity
栏目名称
DOI
10.12441/spyswjs.20230308001
发布时间
2025-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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