Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
Establishment of a Eu-TRFM Immunochromatographic Test Strip for Detection of Escherichia coli O157:H7
摘要[目的]建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法.[方法]运用 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7.通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度.[结果]在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×103 CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1 000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应.另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能.[结论]该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测.
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