基于DNA银纳米簇的金黄色葡萄球菌检测方法的构建
Construction of Staphylococcus aureus Detection Method Based on DNA Silver Nanoclusters
摘要[目的]建立一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)检测方法,用于食品中该致病菌的高效检测.[方法]以金黄色葡萄球菌为研究对象,基于指数扩增反应(exponential amplification reaction,EXPAR)结合DNA银纳米簇(P-AgNCs)开发了一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌荧光检测方法EXPAR-P-AgNCs.通过设计识别探针,可在金黄色葡萄球菌存在的情况下触发EXPAR,生成大量的靶标DNA(T),T与发夹P结合,富G序列远离P-AgNCs,从而降低P-AgNCs的相对荧光强度,实现了对金黄色葡萄球菌的检测.[结果]金黄色葡萄球菌浓度在1×102~1×106 CFU/mL时,相对荧光强度与其浓度呈线性相关,检测限达10 CFU/mL,且特异性明显,无交叉反应.在牛奶、猪肉样品中加入金黄色葡萄球菌,利用该方法测定金黄色葡萄球菌,回收率为94.5%~115.0%.[结论]所构建的检测方法灵敏度高、特异性好,为病原微生物及其他影响食品安全的污染物的检测提供了思路.
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