换一批摘要[目的]建立N-乙酰-反式-4-羟脯氨酸(N-acetyl-trans-4-hydroxyproline,N-ATHOP)的生物合成工艺过程.[方法]利用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)作为表达宿主,异源表达耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)来源的酰基转移酶(MsAcT),并结合半理性设计得到能催化合成N-ATHOP的突变体MsAcT(S11C).[结果]突变体MsAcT(S11C)的最适反应条件为:pH为6.9、反应温度为49℃、反式-4-羟脯氨酸(trans-4-hydroxyproline,THOP)初始浓度为 315.5 mmol/L、乙酸乙烯酯体积分数为 10%.在此条件下,MsAcT(S11C)催化 12 h后合成的N-ATHOP产量达 4.71 g/L,对应转化率为 10.95%.[结论]突变体MsAcT(S11C)成功实现由THOP到N-ATHOP的微生物酶法生物合成.
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关键词
耻垢分枝杆菌酰基转移酶羟脯氨酸N-乙酰化生物合成Mycobacterium smegmatisacyltransferasehydroxyprolineN-acetylationbiosynthesis
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DOI
10.12441/spyswjs.20240320002
发布时间
2025-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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