换一批β-烟酰胺单核苷酸制备用酶的共表达及其应用
Co-expression and Application of Enzymes for Preparation of β-Nicotinamide Mononucleotide
摘要[目的]降低生产β-烟酰胺单核苷酸(β-NMN)的成本,并简化其酶催化法的生产流程.[方法]在作者所在课题组前期建立的6种酶催化合成β-NMN体系的基础上,将这6种酶基因进行两两组合,构建双酶共表达重组菌;采用共表达获得的粗酶液进行多酶级联催化反应,以合成β-NMN.[结果]当底物D-核糖浓度为10 mmol/L时,β-NMN的产率达72.90%;各双酶共表达重组菌的最佳发酵条件均为诱导温度25℃、IPTG诱导浓度0 mmol/L;确定了对5-磷酸核糖-1-焦磷酸合成酶(Ec Prs)储存稳定性有显著提升作用的盐离子和多羟基化合物,且发现Mn2+、乳糖和山梨醇对β-NMN产率基本无影响.[结论]该研究建立的双酶共表达体系下多酶级联催化反应制备β-NMN的方法,以及对Ec Prs储存稳定性的优化策略,为酶催化法合成β-NMN提供了新思路.
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关键词
β-烟酰胺单核苷酸双酶共表达重组菌多酶级联催化反应储存稳定性β-nicotinamide mononucleotiderecombinant strains for dual-enzyme co-expressionmulti-enzyme catalytic cascade reactionstorage stability
栏目名称
DOI
10.12441/spyswjs.20240103001
发布时间
2025-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中央高校基本科研业务费项目（5812050205226750）
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