换一批强化表达PEPC促进谷氨酸棒状杆菌合成4-羟基异亮氨酸
Enhanced Expression of PEPC Promotes the Synthesis of 4-Hydroxyisoleucine by Corynebacterium glutamicum
摘要[目的]实现在谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum,C.glutamicum)中高效合成4-羟基异亮氨酸(4-hydroxyisoleucine,4-HIL).[方法]用不同强度的异亮氨酸(isoleucine,Ile)激活型启动子(PbrnFEN)动态上调异亮氨酸双加氧酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido和透明颤菌血红蛋白(VHb)基因vgb的表达.在此基础上,使用不同强度的组成型启动子加强磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因ppc和丙酮酸羧化酶基因pyc的表达.[结果]在携带不同PbrnFEN启动子的重组菌株中筛选得到菌株C.glutamicum SN-I7V7(SN-I7V7),发酵 144 h后,其 4-HIL浓度达到了(109.14±1.03)mmol/L,比对照菌株C.glutamicum SN02(SN02)提高了46.69%.再利用强启动子PtacM过表达ppc基因后,最终得到一株生产 4-HIL的优势菌株C.glutamicum RS-MP(RS-MP).该菌株的 4-HIL浓度达到了(145.76±6.04)mmol/L,比对照菌株SN-I7V7 提高了 33.55%.[结论]筛选得到的PbrnFEN组合和ppc过表达策略为4-HIL在C.glutamicum中高效合成提供了理论依据.
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关键词
4-羟基异亮氨酸谷氨酸棒状杆菌异亮氨酸双加氧酶磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶4-hydroxyisoleucineCorynebacterium glutamicumisoleucine dioxygenasephosphoenolpyruvate carboxylase
栏目名称
DOI
10.12441/spyswjs.20240315003
发布时间
2025-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
食品科学与资源挖掘全国重点实验室资助项目（SKLF-ZZA-201904）
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