摘要[目的]构建琥珀酸生物合成细胞工厂,实现琥珀酸的高效合成.[方法]以马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus,K.marxianus)为底盘菌株,通过代谢工程策略,包括阻断副产物合成路径、强化糖酵解途径、构建异源琥珀酸合成途径、优化关键酶表达量、增强琥珀酸跨膜转运能力等,构建了生物合成琥珀酸的酵母工程菌株.最后,通过发酵工艺优化提高其生产能力.[结果]在 5 L 发酵罐上,工程菌株K.marxianus SA011的琥珀酸产量、得率和生产强度分别达到了10.06 g/L、11.4%和0.15 g/(L·h).[结论]该研究为K.marxianus的代谢工程改造提供了新思路,也为利用酵母高效生物合成琥珀酸及其工业化应用奠定了重要基础.
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