换一批VEGF经PI3K-Akt-Bad通路降低冻存后EOCs凋亡率
VEGF decreases the apoptosis rate of cryopreserved EOCs via PI3K-Akt-Bad signaling pathway
摘要目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）对低温冻存内皮生长晕细胞（EOCs）凋亡率的影响及其与PI3K-Akt-Bad信号通路的关系，研究VEGF降低低温冻存EOCs凋亡率的可能机制。方法：采用密度梯度离心法分离人脐带血中的单个核细胞，经体外扩增培养EOCs，用免疫细胞化学染色及荧光染色法鉴定细胞的内皮特性。以扩增后的第二代细胞为生物材料，将其分为W组（wortmannin干预24 h后冻存）、W+V组（wortmannin 干预24 h后+50μg/L VEGF冻存）、BC组（空白对照组）、V组（50μg/L VEGF冻存），于-80℃冻存24 h后复苏。用流式细胞术检测EOCs凋亡率，Western blot法检测p-Akt、Bad、Caspase 3的表达量。结果：采用体外扩增培养的EOCs具有多种内皮细胞特性。低温冻存会增加EOCs的凋亡率（为5.36%±0.27%），但50μg/L VEGF能够降低低温冻存和复苏过程EOCs的凋亡率（为3.36%±0.27%，P＜0.05）；经wortmannin对PI3K特异性抑制后，VEGF对EOCs的保护作用减弱，细胞的凋亡率增加（为8.34%±0.57%，P＜0.05）；加50μg/L VEGF的EOCs冻存细胞p-Akt表达升高而Bad和Caspase 3表达降低（均P＜0.05），经wortmannin干预24 h后的EOCs冻存细胞p-Akt表达降低而Bad和Caspase 3表达升高（均P＜0.05）。结论：50μg/L VEGF能够降低低温冻存EOCs的凋亡率，其作用可能通过PI3K-Akt-Bad信号通路来实现。
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关键词
血管内皮生长因子内皮生长晕细胞冻存凋亡信号通路vascular endothelium growth factorendothelial outgrowth cellscryopreservationapoptosissignaling pathway
医学主题词
细胞(Cells)内皮(Endothelium)血管内皮生长因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A)生长(Growth)低温(Hypothermia)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.2095-9400.2014.12.008
发布时间
2015-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
温州市科技局科研项目（Y20110032）
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